식품공전 미생물 캠필로박터 제주니/콜리 실험방법

캠필로박터 제주니/콜리는 가금류인 닭, 오리 등에서 검출될 수 있는 식중독균으로 시험방법에 대해 알아보겠습니다.

출처 : Pixabay

캠필로박터 제주니/콜리란?

캠필로박터 제주니/콜리(Campylobacter jejuni/coli)는 그람음성균으로 주로 가금류의 장에 존재하며 특히 닭의 장에서 많이 발견됩니다. 캠필로박터 제주니콜리에 감염되게 되면 설사, 복통, 발열 등 위장 장애를 주로 일으키며 중증으로 이어지는 경우 합병증이 발생할 수 있기 때문에 주의해야 합니다. 이를 예방하기 위해 날것은 피하고 덜 익힌 계란, 가금류, 육류 등의 음식은 충분히 익혀먹고 식중독이 발생하지 않도록 위생관리에 신경써야 합니다.

 

캠필로박터 제주니/콜리 실험 배지

- 증균배양

1. 식품 및 식육 : Campylobacter supplement A,B를 첨가한 HUNT 배지(배지 47), Bolton 배지(배지 68) 또는 Preston배지(배지 78)

2. 소, 돼지도체 : BPW, 혈액미첨가 2XBolton 배지

3. 닭, 오리도체 : 혈액미첨가 2XBolton 배지

- 분리배양

modified Campy blood free 한천배지(배지 48), Preston 한천배지(배지 75), Abeyta-Hunt Blood 한천배지 (배지 49), CCA 한천배지(배지 76), BCA 한천배지(배지 77) 중 택1

 

캠필로박터 제주니/콜리 실험방법(증균배양)

- 식품 및 식육

Campylobacter supplement A,B를 첨가한 HUNT 배지, Bolton 배지, Preston 배지 중 한가지를 사용하며 배지 100ml와 검체 25g 또는 25ml를 넣고 균질화 시킨 후 35~37℃, 4~5시간 동안 미호기적으로 1차 증균 후 42±1℃에서 44±4시간 동안 미호기적으로 2차증균을 진행합니다.

※2차 증균 시 유제품은 Rifampicin용액 0.4ml, 일반식품은 Cefoperazone용액 0.4ml를 첨가합니다.

 

- 소, 돼지도체

1. 멸균가아제나 스펀지로 시료를 채취하고 BPW 25ml와 균질화 합니다.

2. 균질화한 용액과 혈액미첨가 2XBolton배지 25ml를 미호기 조건으로 42±1℃, 48±2시간 배양합니다.

 

- 닭, 오리도체

1. 닭 시료 채취방법에 따라 시료를 채취하고 혈액미첨가 2XBolton배지 30ml와 채취한 시료 20ml를 균질화 합니다.

2. 균질화한 액상을 미호기적 조건에서 42±1℃, 48±2시간 배양합니다.

 

캠필로박터 제주니/콜리 실험방법(분리배양)

실험하려는 식품에 따라 전처리 및 증균배양을 마친 증균배양액을 modified Campy blood free agar(mCCDA배지), Abeyta-Hunt Blood agar, Preston agar, CCA agar, BCA agar 중 1가지를 택하여 스트레킹으로 접종 후 42℃, 24~48시간 미호기적으로 암소에서 배양하고 의심집락을 판독합니다.

- mCCDA배지 : 반투명한 흰색 또는 투명한 집락

- Abeyta-Hunt Blood agar : 무지개빛 광택 집락

- CCA, BCA agar : 점액이 있으며 회색인 평평한 집락

- Preston agar : 반투명의 흰색집락(일부 균주는 연한 핑크색이나 황갈색 집락을 형성)

 

캠필로박터 제주니/콜리 실험방법(확인시험)

분리배양 배지에서 의심집락을 선별해 혈액한천배지(Blood Agar)에 접종 후 42℃, 24~48시간동안 미호기적으로 배양 합니다. 배양한 집락은 암시야 또는 위상차현미경으로 검경하거나 대비염색해 지그재그 모양을 관찰합니다.

- 대비염색 : crystal violet 2방울+식염수 10ml

현미경으로 확인된 균은 catalase, oxidase 테스트 양성을 확인하고 확인시험을 진행 합니다.

- 캠필로박터 제주니 : 25℃에서 비생육, hippurate 분해 양성, 황화수소 비생성

- 캠필로박터 콜리 : 25℃에서 비생육, hippurate 분해 음성 등 생화학 실험 실시